重型斑秃的组织病理学观察

斑秃是一种遗传与免疫因素共同作用导致的毛囊慢性炎症，^[1]重型斑秃则系脱发区＞头皮面积1/3或病程超过1年仍无好转趋势者。^[2]我们征得患者同意，对6例重型斑秃和1例正常头皮的普通病理、免疫组化和超微结构进行了系统观察研究，报告如下。

1 材料与方法

1.1 临床资料

选择重型斑秃患者6例，全部为男性。年龄25～45岁，病程3个月～2年，其中活动期2例，静止期2例，恢复期2例。另设正常对照1例。

1.2 方法

1.2.1 普通病理：头皮组织切取后，即刻用10%福尔马林液固定，垂直表皮切开，常规石蜡包埋连续切片，分别行HE和PAS染色。毛囊生长周期根据文献^[2] 界定。在10×4倍光镜下，每一切片取3个不同的视野，计数和观察毛囊各个生长周期的变化，并统计分析。
1.2.2 免疫组化：常规制片。染色方法：采用Maixin公司S-P免疫组化染色超敏试剂盒。一抗为CD4^＋、CD54（购自DAKO公司）、CD8^＋、HLA-DR（购自Maixin公司）。

1.2.3 透射电镜：常规制片，JEM-1200EX型透射电镜观察、拍照。加速电压80KV。

2 结果

2.1 普通病理

2.1.1炎性改变：6例重型斑秃患者标本均有不同程度的以淋巴细胞为主的单一核细胞浸润，其中2例活动期患者淋巴细胞浸润最为明显，浸润部位主要是毛囊周围、毛囊中及真皮毛细血管周围，呈较密集团块状或条索状（见图1）。静止期标本炎细胞浸润明显减少，恢复期则更为稀少，与正常对照无明显区别。
2.1.2 毛囊改变：多数重型斑秃患者的毛囊位置上移、变浅，位于真皮中上部，

毛囊数量较正常对照明显减少（P＜0.001，见表），病程越长，毛囊数量越少，甚至个别视野呈现大片空白无毛囊区。毛囊外根鞘细胞减少而使毛囊变小、变薄，或毛囊外根鞘细胞较广泛空泡化。与正常对照相比，患者毛囊大多处于退化期和休止期，差别显著（P＜0.001，见表）。毛发纤细，毛囊上皮皱缩，毛囊纤维鞘膜增厚。正常对照则毛囊数量多，几乎均处于生长期，毛干粗壮。
表重型斑秃患者皮损处毛囊变化情况（ ±S）

组别	n	视野	毛囊总数	生长期毛囊	退行期和休止期毛囊
斑秃组	6	18	10.16±2.47**	1.75±1.24**	8.37±3.19**
对照组	1	3	15.42±3.78	14.34±3.56	1.09±0.54

与对照组比，**P＜0.001

2.1.3 其它改变：活动期患者胶原纤维变细，病程长者毛囊周围胶原纤维则变粗；个别标本基底细胞局灶性液化变性，皮脂腺相对丰富、分泌旺盛。

2.2 免疫组化

在活动期病例，CD4^＋、HLA-DR在毛囊周围、毛囊内外根鞘及真皮血管周围广泛浸润，尤以毛囊内外最为密集（见图2、3）。CD54在上述部位也有表达，但较之量少。CD8^＋表达很少或无表达。在静止期和恢复期病例，CD4^＋、HLA-DR在毛囊周围及真皮血管周围少量浸润，CD8^＋则无，CD54很少。正常对照仅HLA-DR在真皮血管周围有少量表达，与患者相比，具有显著差异。

2.3 超微结构

透射电镜观察显示，正常头皮毛囊外毛根鞘细胞结构完整，位于毛囊基底层，可见明显的桥粒结构及细胞间隙，并可见清晰的不同切面的张力微丝。细胞核呈圆形或椭圆形，核膜光滑、清晰，各细胞器未见异常。毛干清晰且呈较为紧密的年轮状。6例斑秃患者的毛囊外毛根鞘细胞所切部位与正常对照相同，也位于毛囊基底层，但细胞结构呈不同程度的病理改变。细胞桥粒间隙增大，张力微丝拉长，细胞核变形，核膜凹凸不平或有深达500nm的切迹，呈瓜子状、枣核状、哑铃状或不规则形状，有一例呈齿轮状（见图4、5）；核膜大都清楚，严重的一例略为模糊；核内微细结构较正常对照模糊；线粒体肿胀，毛干中出现较多空泡和角质颗粒，年轮样结构较松散，“轮”不同程度地变细或扭曲。

3 讨论

我们发现患者毛囊及血管周围浸润的淋巴细胞数量，活动期＞静止期＞恢复期，与杜氏^[3]观察的结果基本一致。进一步通过免疫组化发现，毛囊及真皮血管周围浸润的淋巴细胞大多是CD4^＋T细胞，只有少量CD8^＋T细胞，活动期最为明显，与Ghersetrick等^[4]报道一致。应该指出的是，HLA-DR也在毛囊、血管周围大量表达，表明HLA-Ⅱ类抗原在斑秃发病中具有重要作用，它把抗原呈递给CD4^＋T细胞并使之活化，从而导致毛囊限制性炎症而引发斑秃。本研究还发现，CD54在毛囊和血管周围也有少量表达，提示其也参与了淋巴细胞向毛囊的聚集，参与斑秃发病。患者的毛囊与正常对照相反，绝大部分处于退行期和休止期，因而发生斑秃。
透射电镜发现，毛囊外毛根鞘细胞细胞桥粒间隙增大，张力微丝拉长，细胞核不同程度地变形，核内微细结构较正常对照模糊，线粒体肿胀，毛干中出现较多空泡和角质颗粒，年轮样结构较松散，“轮”不同程度地变细或扭曲。可以认为，由于自身免疫的作用，导致毛囊细胞出现病变，进而影响毛发生长，最终导致斑秃形成。本次毛囊外根鞘细胞超微结构观察结果与高顺强等^[5]的结果不尽相同，我们观察的更为细致。

参考文献

[1] 陈炜. 斑秃病因的研究进展[J]. 国外医学·皮肤性病学分册2001，27（1）：16-19.

[2] 张景政，刘荣卿，钟白玉，等. 斑秃毛发生长周期观察[J]. 临床皮肤科杂志，1990，（3）：120-122

[3] 杜举贤，梁清，王德英. 斑秃的组织病理观察[J]. 中华皮肤科杂志，1987，20（5）：277-279

[4] Ghersetrick I, Campanile G, Lotti T. Alopecia areata:immunohistochemistry and ultrastructure of infiltrate and identification of adhesion molecule receptors[J].Int J Dermatol，1996，35：28-33

[5] 高顺强，李美洲，张学新，等. 斑秃皮损区毛囊角质形成细胞超微结构的初步观察[J]. 河北医科大学学报，2002，23（6）：343-344